salit! je souhaiteré débuté dans la culture in vitro...
j'ai déja éssayé mais bon...
j'avais commander des boites de pétri avec du milieux déja préparer et j'y et mis des graine, j'ai eu plus de bactéries que autre chose...
je voudrais réésayer mais pourrier vous me dire toute les étapes que je dois faire pour faire de la culture in vitro de bouture et de graine?
mon materiel:
boite de pétri avec du milieux déja préparé
scalpel...
(mon pére est pharmacien, j'ai tout ce qui faut!)
merci beaucoup @+
in vitro debut!
salut
pour ne pas avoir plein de bactérie il faut simplement que lorsque tu travaille tout ton environnement soit stérile voila
Pour être plus précis je sors ma doc. la dessus:
alors faut déjà que tout ton matose soit stérile les boit de pétri compris après il faut désinfecter les graines avec de l’Hypochlorite de calcium(5gr pour 200ml) le temps de désinfection dépend des plantes que tu as choisis
la manipe:
tu dois avoir préparé une flamme genre camping gaz (moi je l'ai fait ds la cuisine sur le feux)
il ne doit pas avoir de vent (ferme toutes les portes et tu peux même mettre un masque)
tu te passe les mains a l'alcool
tu allume le feu une foi allumer tout ce qui doit rester stérile doit resté près de la flamme pas plus de 20cm
tu désinfecte les graines
tu ouvre ton milieu de culture près de la flamme et tu mets t'es graines
et tu referme
le truc c'est jamais s'éloigné de la flamme car la flamme te désinfecte tout l'air alentour
voila en gros un résumé
je ne suis pas un spécialiste mais je l'ai déjà fait et sa a marché maintenant je croie qu'il y a des pro sur ce forum qui peuvent te guider avec plus de détaille
j’espère mettre fait comprendre
a+
pour ne pas avoir plein de bactérie il faut simplement que lorsque tu travaille tout ton environnement soit stérile voila
Pour être plus précis je sors ma doc. la dessus:
alors faut déjà que tout ton matose soit stérile les boit de pétri compris après il faut désinfecter les graines avec de l’Hypochlorite de calcium(5gr pour 200ml) le temps de désinfection dépend des plantes que tu as choisis
la manipe:
tu dois avoir préparé une flamme genre camping gaz (moi je l'ai fait ds la cuisine sur le feux)
il ne doit pas avoir de vent (ferme toutes les portes et tu peux même mettre un masque)
tu te passe les mains a l'alcool
tu allume le feu une foi allumer tout ce qui doit rester stérile doit resté près de la flamme pas plus de 20cm
tu désinfecte les graines
tu ouvre ton milieu de culture près de la flamme et tu mets t'es graines
et tu referme
le truc c'est jamais s'éloigné de la flamme car la flamme te désinfecte tout l'air alentour
voila en gros un résumé
je ne suis pas un spécialiste mais je l'ai déjà fait et sa a marché maintenant je croie qu'il y a des pro sur ce forum qui peuvent te guider avec plus de détaille
j’espère mettre fait comprendre
a+
Nicolas
Trésorier Dionée
http://www.dionee.org/
http://eee2013.dionee.org/
https://www.facebook.com/Dionee.association
Trésorier Dionée
http://www.dionee.org/
http://eee2013.dionee.org/
https://www.facebook.com/Dionee.association
les graine je dois les enfonsser???
et comment je fais pour stériliser les boite de pétri???
car il y a déja du milieux dedans et les boite sont en plastique!
et elle ne peuvent pas rester stérile les boites il y a un petit jour entre le couvercle et la boite!
sinon tu peux me dire comment rendre les boite de petri stérile?
et une fois que les graine sont mise je fait comment???
si je l'enléve de la flamme sa sera pu stérile?
merci beaucoup@+
et comment je fais pour stériliser les boite de pétri???
car il y a déja du milieux dedans et les boite sont en plastique!
et elle ne peuvent pas rester stérile les boites il y a un petit jour entre le couvercle et la boite!
sinon tu peux me dire comment rendre les boite de petri stérile?
et une fois que les graine sont mise je fait comment???
si je l'enléve de la flamme sa sera pu stérile?
merci beaucoup@+
=====>ma signature<=====
alors les graines tu as juste besoin de les posé sur le milieu et évite de faire trop d'aller retour pour poser les graines pour éviter les mouvements d'aire
si tu as acheté du milieu près a l'emploi sa devrais être déjà stérile tant que tu soulève pas le couvercle de la boite si tu l'ouvre n'importe où c foutu faut que l'environnement soit stérile donc tu l'ouvre au dernier moment près de la flamme et tu referme la boite toujours près de la flamme une foi que c'est fermé tu peux la mettre ou tu veux
après il faut que tu place ta boite à la lumière moi je l'est laisser près d'une fenêtre mais si tu as des lampes met les dessous et attend
Quelle graines tu va mettre? car pour la désinfection des graines si tu laisse trop longtemps la graine meurt et si tu laisse pas assez longtemps tu désinfecta pas assez
les drosera et ping c'est ~3min
dionée aldro ~7min
nep~2min
si tu passe chez raph pour des plantes comme je l'ai vus dans un autre poste préviens moi je pourrais te prêter la doc.
a+
si tu as acheté du milieu près a l'emploi sa devrais être déjà stérile tant que tu soulève pas le couvercle de la boite si tu l'ouvre n'importe où c foutu faut que l'environnement soit stérile donc tu l'ouvre au dernier moment près de la flamme et tu referme la boite toujours près de la flamme une foi que c'est fermé tu peux la mettre ou tu veux
après il faut que tu place ta boite à la lumière moi je l'est laisser près d'une fenêtre mais si tu as des lampes met les dessous et attend
Quelle graines tu va mettre? car pour la désinfection des graines si tu laisse trop longtemps la graine meurt et si tu laisse pas assez longtemps tu désinfecta pas assez
les drosera et ping c'est ~3min
dionée aldro ~7min
nep~2min
si tu passe chez raph pour des plantes comme je l'ai vus dans un autre poste préviens moi je pourrais te prêter la doc.
a+
Nicolas
Trésorier Dionée
http://www.dionee.org/
http://eee2013.dionee.org/
https://www.facebook.com/Dionee.association
Trésorier Dionée
http://www.dionee.org/
http://eee2013.dionee.org/
https://www.facebook.com/Dionee.association
Salut,
Je suis loin d'être un pro de la culture in vitro mais je commence à avoir quelques bon résultats. Voici des conseils que je peux te donner. Déjà, évite pour l'instant de faire des tentatives à partir de boutures, l'étape de désinfection est très aléatoire. En particulier pour les plantes possédant du mucilage (protection des spores vis-à-vis du traitement désinfectant). Le plus simple et le plus facile est d'utiliser des graines comme matériel de départ. Elles sont beaucoup plus faciles à utiliser. Lorsque tu auras réussi, tu pourras t'attaquer à la multiplication par bouturage en utilisant certains de tes plants, qui seront stériles, et ainsi maintenir des stocks d'espèces en culture in vitro (CIV).
Sinon,
Soit TRES PRUDENT si tu utilise de l'alcool près d'une flamme, ça peut paraître évident mais il suffit d'un instant d'inattention, je me suis fait surprendre plus d'une fois. Idem avec l'hypochlorite de calcium, c'est un produit très irritant et corrosif.
Pour le côté technique, ça peut te paraître rébarbatif de collecter tous les renseignements nécessaires mais c'est essentiel. Si ton père est pharmacien, je suis sûr qu'il pourra t'aider. Fait tes premières manips avec lui.
N'hésite pas si tu as d'autres questions
A+
Je suis loin d'être un pro de la culture in vitro mais je commence à avoir quelques bon résultats. Voici des conseils que je peux te donner. Déjà, évite pour l'instant de faire des tentatives à partir de boutures, l'étape de désinfection est très aléatoire. En particulier pour les plantes possédant du mucilage (protection des spores vis-à-vis du traitement désinfectant). Le plus simple et le plus facile est d'utiliser des graines comme matériel de départ. Elles sont beaucoup plus faciles à utiliser. Lorsque tu auras réussi, tu pourras t'attaquer à la multiplication par bouturage en utilisant certains de tes plants, qui seront stériles, et ainsi maintenir des stocks d'espèces en culture in vitro (CIV).
Sinon,
Non, laisse les en surface.guicha a écrit :les graine je dois les enfonsser???
Si tu as acheté des boîtes de Pétri toutes prêtes avec du milieu, elles sont déjà stériles.guicha a écrit :et comment je fais pour stériliser les boite de pétri???car il y a déja du milieux dedans et les boite sont en plastique!
C'est vrai que les boîtes de Pétri ne sont pas étanches, car à l'origine elles sont conçues pour cultiver des microorganismes qui ont besoin de respirer tout comme nous. Sur une période de quelques jours, voir quelques semaines, tu peux les garder stérile, mais à plus long terme ça risque effectivement de poser des problèmes de contamination. De toutes façons, la CIV en boîtes de Pétri ne va te permettre de faire essentiellement que de la germination de graines en raison du confinement. Lorsque les plants auront une certaine taille, tu devras les repiquer dans des contenants plus grand (flacons).guicha a écrit :et elle ne peuvent pas rester stérile les boites il y a un petit jour entre le couvercle et la boite!
Tu dois tout d'abord stériliser tes graines dans un solution désinfectante d'hypochlorite de calcium. Certains utilisent avec succès de l'eau de javel ou même du Domestos. Pour les protocoles de préparations, tu devrais visiter cette page. En faisant une petite recherche sur le net, tu trouveras pas mal de liens de ce genre. A partir du moment où tu commence la stérilisation, fait toutes tes manipulations dans la zone de stérilité au tour de la flamme. Une fois les graines prêtes, dépose les à la surface de la gélose et ferme le couvercle, tu peux alors sortir de la zone de stérilité.guicha a écrit :une fois que les graine sont mise je fait comment???
si je l'enléve de la flamme sa sera pu stérile?
Soit TRES PRUDENT si tu utilise de l'alcool près d'une flamme, ça peut paraître évident mais il suffit d'un instant d'inattention, je me suis fait surprendre plus d'une fois. Idem avec l'hypochlorite de calcium, c'est un produit très irritant et corrosif.
Pour le côté technique, ça peut te paraître rébarbatif de collecter tous les renseignements nécessaires mais c'est essentiel. Si ton père est pharmacien, je suis sûr qu'il pourra t'aider. Fait tes premières manips avec lui.
N'hésite pas si tu as d'autres questions
A+
Pour examiner la vérité il est besoin une fois en sa vie, de mettre toutes choses en doute autant qu'il se peut.
René Descartes
René Descartes
il te donne les boîtes de Pétri déjà pleines de milieu ou c'est toi qui les remplit?
Sinon, pour la bouture in vitro, ceci consiste à prélever une feuille sur une plante en CIV obtenue par semis ou autre, et de repiquer celle-ci sur un milieu d'enracinement pour obtenir de nouvelles plantes.
Sinon, pour la bouture in vitro, ceci consiste à prélever une feuille sur une plante en CIV obtenue par semis ou autre, et de repiquer celle-ci sur un milieu d'enracinement pour obtenir de nouvelles plantes.
Pour examiner la vérité il est besoin une fois en sa vie, de mettre toutes choses en doute autant qu'il se peut.
René Descartes
René Descartes